菌種的分裝及凍干過程,菌種分裝安瓿時可用滅菌的長滴入安瓿管底部,每管分裝量約0.1~0.2毫升,分裝安瓿管時間盡量要短,在1-2小時內(nèi)分裝完畢并預(yù)凍。分裝時應(yīng)注意在無菌條件下操作。對于細菌制品,預(yù)凍過程一般通過“兩步法”來完成。先是以慢速進行降溫,讓細胞外的溶液中產(chǎn)生冰,細胞內(nèi)的水分通過細胞膜滲向胞外,胞內(nèi)溶液的濃度逐漸提高;然后是以較高速率進行降溫,以實現(xiàn)胞內(nèi)溶液的玻璃化。菌種預(yù)凍1~2小時將冷凍后的樣品安瓿管置于凍干機的干燥箱內(nèi),凍干機開始冷凍干燥,時間一般為8-20小時。終止干燥時間應(yīng)根據(jù)下列情況判斷:①安瓿管內(nèi)凍干物呈酥塊狀或松散片狀;②真空度接近空載時的較高值;③選用1-2支對照管,其水份與菌懸液同量,視為干燥完結(jié)。
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